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使用?；ぶ山档头治鲋芪廴镜某潭?/h1>
更新时间：2018-01-09      点击次数：2878
在液相分析检测样品的过程中，色谱柱会受到来自于样品及色谱系统的污染，从而导致色谱柱耐用性差、寿命缩短。
来自于色谱系统的污染主要指，HPLC仪器系统中部件磨损而产生的固体颗粒，以及流动相系统过滤不*残留的固体颗粒。来自于样品的污染主要指，未*溶解的样品或者已*溶解的样品进入色谱系统中，由于样品溶剂和流动相溶剂对样品溶解存在的溶解度差异，导致沉淀析出污染系统。
特别是对于中药、天然产物、合成中间体及生物药品的检测，因基质的复杂性，色谱柱受污染的情况会更加严重。污染会导致色谱系统压力升高、色谱柱塌陷、填料变色等，从而带来检测成本高，测试结果不准确等各种影响。
 
保护柱是液相色谱分析中重要的色谱耗材，使用保护柱可大大降低分析柱受污染的程度，延长分析柱使用寿命。
?；ぶ挥诮饔敕治鲋?， 作用主要两方面：
1. 截留不溶性颗粒 
2. 吸附样品基质中的杂质
以下几种情况建议使用?；ぶ?/div>
1. 中药、天然产物及合成中间体等基质较复杂的样品分析——因溶解性差异导致样品析出而污染分析柱的情况比较严重，梯度洗脱时影响更大。
2. 生物样品分析——因样品的不可逆吸附导致的污染，?；ぶ上扔诜治鲋惺苷庵治廴荆佣映し治鲋倜?。
 
保护柱很重要，但选择合适的保护柱更重要，选择或使用不当也可能带来截然相反的效果。
保护柱分类及选择：
从材质上分：不锈钢材质和PEEK（聚醚醚酮）材质
PEEK 材质优缺点——样品对金属离子比较敏感时，选择PEEK材质比较合适，比如某些蛋白分析会用到PEEK材质的分析柱，主要就是考虑到这方面的因素；
不锈钢材质优缺点——大部分小分子化合物的分析，选择不锈钢材质保护柱居多，特别是当流动相体系使用到四氢呋喃（THF）或DMSO等一些溶解性较强的溶剂时，必须选择不锈钢材质，甚至对于HPLC系统的管路也需要替换成不锈钢材质，因THF对于PEEK管路有相当强的腐蚀作用。
 
从结构上分：卡套式（柱芯+柱套）和直接填装短柱
直接填装短柱优缺点——这种结构的?；ぶ抵示褪嵌痰纳字?，一般填装的填料跟分析柱填料*一样。生物样品分析中，用这种类型?；ぶ佣啵晒艘恍┎蝗芸帕Ｍ?，还可除去一些在分析柱上易吸附的杂质。缺点是，一次性使用，污染严重时，只能报废。
卡套式?；ぶ湃钡?mdash;—卡套式?；ぶ闹卓煞锤词褂?，柱芯污染后可替换，厂家会提供配套的?；ぶ荆郝蚴毙枰⒁?，柱芯中有与分析柱匹配的填料，需要确认柱芯中的填料类型再购买。同时，柱芯和柱套需是来源于同一厂家的同一规格，否则，会存在匹配上的差异，导致峰型异?；蛘呗┮?。
从连接方式上分：独立式和直连式
独立式?；ぶ湃钡?/div>
——保护柱和分析柱之间用一段管路连接，不用担心与分析柱在连接上的匹配问题。但使用管路连接时，连接不当容易产生死体积。
直连式?；ぶ湃钡?mdash;—?；ぶ涌诖菸疲芍苯佑敕治鲋?，死体积小，UPLC分析时建议选择直连式?；ぶ蝗钡悖汗郝蚴毙璞Ｖそ涌谟敕治鲋ヅ?。
 
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1. 除非特殊情况，一般选择填料基质与分析柱基质*相同的?；ぶ?。
2. 选择保护柱尺寸可按柱体积计算，保护柱体积按分析柱体积的5%~10%即可；如4.6*250mm的分析柱体积约为4mL，保护柱体积可选择在0.2~0.4mL之间为宜。同时，?；ぶ诰队τ敕治鲋诰断嗤蛳嗟?。
 
保护柱使用注意事项：
1. 独立式?；ぶ敕治鲋邮?，连接管路尽可能短，且接口切面平滑，尽量减少死体积以降低柱外展宽效应。
2. 卡套式?；ぶ话阄幢曜⒁毫鞣较?，使用时自行标注，并按照标注方向来使用，以免正反向使用后，截留的杂质污染分析柱。
3. 直接填装的短柱型?；ぶ?，出现柱压升高或峰型变差时，可不接分析柱进行反向清洗，清洗溶剂可参考分析柱清洗溶剂。
4. 卡套式保护柱，柱芯替换时，注意柱芯与柱套是否存在方向上的匹配，同时不易旋拧过紧，以防滑丝。
5. ?；ぶ蛑疽话悴唤ㄒ槌逑?，因可能对填料表面修饰有影响。
6. 如同一保护柱配不同的分析柱使用，每次使用前，?；ぶ柘惹逑床⒂昧鞫嗥胶獗；ぶ欢问奔浜?，再接分析柱使用。
?；ぶ胫肮似鞯那鸷褪褂茫?/div>
使用?；ぶ?/strong>的目的在于延长分析柱的使用寿命，当分析柱造价昂贵时，?；ぶ募壑涤绕淠芴逑?，某些情况下，当使用的分析柱本身价格便宜，?；ぶ⒎潜匮?，推荐使用柱前过滤器更合适。
 
柱前过滤器与保护柱两者外形相似，差异主要在于：保护柱内芯装有填料，而柱前过滤器内芯是可更换的滤片（一般为带孔的不锈钢烧结板）
因此，从结构可以推测使用上的差异：
柱前过滤器——通用性强，任何分析柱前都可使用，因其滤芯只起到过滤和截留杂质的作用，滤片污染后可超声清洗，反复使用。
?；ぶ?mdash;—柱中填料除了起截留杂质的作用外，也可除去样品中易吸附的杂质，这一点对生物样品分析尤其重要。